|
|
Studium role vybraných izoforem cytochromu P450 v cytostatické rezistenci na úrovni apoptózy
Moriová, Magdalena ; Hofman, Jakub (vedoucí práce) ; Novotná, Eva (oponent)
Univerzita Karlova Farmaceutická fakulta v Hradci Králové Katedra farmakologie a toxikologie Studentka: Magdalena Moriová Školitel: RNDr. Jakub Hofman, Ph.D. Název diplomové práce: Studium role vybraných izoforem cytochromu P450 v cytostatické rezistenci na úrovni apoptózy Cytostatická rezistence je jednou z nejzáludnějších terapeutických překážek v onkologické léčbě. Vedle mechanizmů farmakodynamických hrají v lékové rezistenci důležitou roli též faktory farmakokinetické. Mezi takové mechanizmy zřejmě patří i enzymatická transformace účinné látky na neaktivní metabolit v nádorových buňkách, důkazy o zapojení enzymů ve farmakokinetické rezistenci jsou však dosud veskrze pouze nepřímé nebo zatížené interferenčními elementy. Za využití komparativních experimentů v HepG2 liniích s/bez overexprese CYP3A4 jsme se zaměřili na zhodnocení role tohoto klinicky důležitého enzymu v rezistenci vůči docetaxelu. Metodicky se jednalo o stanovení indukce apoptózy (aktivace kaspáz 3/7, 8 a 9) pomocí komerčních luminiscenčních kitů. Naše výsledky poukazující na signifikantní zapojení enzymu CYP3A4 v omezení účinnosti docetaxelu v intervalu 48 h, přičemž v časnějších intervalech se tento závěr nepotvrdil. Tato zjištění výborně korelují s výsledky našich předchozích studií zaměřených na proliferační úroveň. Získané...
|
|
|
Využití fluorescenčních metod pro studium proteinových interakcí
Johaníková, Klára ; Bezděková,, Jaroslava (oponent) ; Pavelicová, Kristýna (vedoucí práce)
Diplomová práce s názvem „Využití fluorescenčních metod pro studium proteinových interakcí“ je zaměřená na využití fluorescenčních metod pro studium proteinových interakcí pomocí elektromigračních metod a Försterova resonančního přenosu energie (FRET). Cílem této práce bylo vytvoření biokonjugátu proteinu metallothioneinu (MT) s kvantovými tečkami (QDs) a komerčními barvivy. Mezi těmito konjugáty byl následně studován FRET. QDs byly syntetizovány za působení UV záření a konjugace s MT byla provedena přes karbodiimidový zerolengthcrooss-linker (EDC/sulfo-NHS), který slouží k aktivaci karboxylových skupin a umožňuje biokonjugaci ligandu kovalentní vazbou. Díky vysokému podílu cysteinů v MT, má tento protein velmi vysokou afinitu ke kovům. Podílí se také na vychytávání volných radikálů a jsou i studie, které dokazují, že dochází ke zvýšené expresi MT v oblasti rakovinných buněk-nádorů. Pozornost byla věnována i studiu dimerizace MT, která vede k pochopení oxidativní dimerizace MT a tím může přispět k pochopení vzniku volných radikálů v těle a k prohloubení znalostí o neurodegenerativních poruchách jako je Parkinsnova nebo, Alzheimerova choroba či amyotrofická laterální skleróza. Vznik dimeru MT, byl potvrzen přenosem energie mezi donorem (QDs) a akceptorem (komerční barvivo-cyanin) skrze fyzikální jev FRET i pomocí MALDI-TOF-MS.
|
|
| |
|
|
Význam platiny v životním prostředí
Brestovská, Marta ; Holubová, Zuzana (oponent) ; Sommer, Lumír (vedoucí práce)
Tato bakalářská práce, se zabývá sledováním jednotlivých sloučenin platiny ve složkách životního prostředí (voda, půda, ovzduší) a metodami jejich stanovení. V práci je také zmíněno neméně podstatné stanovení platiny v tkáních a tělních tekutinách, v případech kdy je platina využívána ve formě např. cisplatiny jako cytostatikum. Stanovuje se pak samotné cytostatikum, popřípadě jeho deriváty a metabolity na bázi platinových komplexů v klinickém vzorku (moč, plasma). Z metod využívaných pro stanovení Pt vyzdvihuje práce hlavně ICP-AES, ICP-MS, ETA AAS, HPLC. Užitečné se zdají být i on-line propojení těchto metod např. ICP-MS s HPLC nebo ICP AES s HPLC. Pro stanovení platiny je možné využít i spektrofotometrické metody za použití organických i anorganických činidel. Tyto metody jsou zde zmíněny spíše okrajově pro kompletnost, z hlediska praktického využití jsou obtížně reprodukovatelné a málo citlivé. Stanovení také znesnadňuje hydrolýza platinových kovů za vzniku nerozpustných hydratovaných oxidů.
|
|
|
Terapie obtížně léčitelných nádorů slinivky břišní pomocí nových metalofarmak a jejich mechanismus působení
Švitelová, Marie ; Prachařová,, Jitka (oponent) ; PhD, Vojtěch Novohradský, (vedoucí práce)
Nádorová onemocnění a protinádorová terapie představuje v současné době velmi aktuální problematiku, ve které jsou veškeré získané poznatky velkým přínosem pro společnost. I přes mimořádný rozvoj tohoto oboru jsou dostupné léčebné přístupy nádorů stále velmi omezené řadou faktorů, které motivují vědecké týmy k nalezení cílené, efektivní terapie. Hlavním cílem této bakalářské práce bylo provést klasifikační cytotoxické testy s nově syntetizovanými enantiomery [Pt(OXA)(1,2-DACHEX)] odvozenými od oxaliplatiny na buněčné úrovni. Při testování výše zmíněných látek jsme se zaměřili na analýzu antiproliferačního působení komplexů a odhalení mechanismu jejich působení. Z výsledků práce vyplývá, že R,R-enantiomer vykazuje vysoké terapeutické účinky při aplikaci na buňky adenokarcinomu pankreatu PSN1. Experimenty dále prokázaly, že mechanismus účinku tohoto komplexu v buňkách karcinomu slinivky břišní zahrnuje ovlivnění lipogeneze, konkrétně inhibici de novo syntézy lipidů. Protinádorové působení zaměřené na ovlivnění metabolismu lipidů představuje nový mechanismus účinku, který dosud nebyl uvažován u klinicky používaných protinádorových platinových léků. Získané informace naznačují, že by R,R-enantiomer mohl představovat budoucí nadějné cytostatikum, které by potenciálně vykazovalo méně nežádoucích účinků na organismus pacienta.
|
|
|
Study and mechanism of new-generation heterocyclic cytostatic with an emphasis on IL-6 andIL-8
Talianová, Veronika ; Jakubek, Milan (vedoucí práce) ; Mikula, Ivan (oponent) ; Babula, Petr (oponent)
CZ Účelem této studie byl screening nových syntetických inhibitorů interleukinů IL-6 a IL- 8, které jsou slibnými cíli pro léčbu rakoviny. Malé molekuly jsou atraktivním přístupem k inhibici těchto signálních drah, o kterých je známo, že jsou důležité pro růst a přežití nádorových buněk. Cílem studie bylo objevit nové inhibitory signálních drah IL-6 a IL-8 screeningem malé knihovny chemických derivátů, včetně π-expandovaných derivátů naftalimidu, Trögerovy báze a pentamethiniových derivátů. Struktury sloučenin byly navrženy na základě studií in silico se zaměřením na blokování signálních drah IL-6 a IL-8. Studie zahrnovala použití různých analytických a bioanalytických metod pro in vitro analýzu nových potenciálních protinádorových léčiv. Sloučeniny byly testovány na cytotoxicitu a jejich účinek na buněčný růst za použití testu proliferace MTT. Jejich protinádorová aktivita byla pozorována u myší NuNu. Invazivita buněk byla monitorována pomocí testu hojení ran. Zobrazení živých buněk bylo použito k detekci distribuce látek na intracelulární úrovni. K detekci selektivity inhibitorů signálních drah IL-6 a IL-8 byly použity další metody, jako ELISA, termoforéza v mikroměřítku a predikce in silico. Absorpční a fluorescenční vlastnosti sloučenin byly také generovány a všechny výsledky byly analyzovány...
|
|
|
Využití fluorescenčních metod pro studium proteinových interakcí
Johaníková, Klára ; Bezděková,, Jaroslava (oponent) ; Pavelicová, Kristýna (vedoucí práce)
Diplomová práce s názvem „Využití fluorescenčních metod pro studium proteinových interakcí“ je zaměřená na využití fluorescenčních metod pro studium proteinových interakcí pomocí elektromigračních metod a Försterova resonančního přenosu energie (FRET). Cílem této práce bylo vytvoření biokonjugátu proteinu metallothioneinu (MT) s kvantovými tečkami (QDs) a komerčními barvivy. Mezi těmito konjugáty byl následně studován FRET. QDs byly syntetizovány za působení UV záření a konjugace s MT byla provedena přes karbodiimidový zerolengthcrooss-linker (EDC/sulfo-NHS), který slouží k aktivaci karboxylových skupin a umožňuje biokonjugaci ligandu kovalentní vazbou. Díky vysokému podílu cysteinů v MT, má tento protein velmi vysokou afinitu ke kovům. Podílí se také na vychytávání volných radikálů a jsou i studie, které dokazují, že dochází ke zvýšené expresi MT v oblasti rakovinných buněk-nádorů. Pozornost byla věnována i studiu dimerizace MT, která vede k pochopení oxidativní dimerizace MT a tím může přispět k pochopení vzniku volných radikálů v těle a k prohloubení znalostí o neurodegenerativních poruchách jako je Parkinsnova nebo, Alzheimerova choroba či amyotrofická laterální skleróza. Vznik dimeru MT, byl potvrzen přenosem energie mezi donorem (QDs) a akceptorem (komerční barvivo-cyanin) skrze fyzikální jev FRET i pomocí MALDI-TOF-MS.
|
|
|
Vliv vybraných cytostatik určených pro terapii leukémie na aktivitu lidských enzymů redukujících karbonylovou skupinu
Šmídlová, Monika ; Novotná, Eva (vedoucí práce) ; Wsól, Vladimír (oponent)
Univerzita Karlova Farmaceutická fakulta v Hradci Králové Katedra biochemických věd Kandidát: Bc. Monika Šmídlová Školitel: RNDr. Eva Novotná, Ph.D. Název diplomové práce: Vliv vybraných cytostatik určených pro terapii leukémie na aktivitu lidských enzymů redukujících karbonylovou skupinu Klíčová slova: reduktázy, leukémie, cytostatika, inhibice K léčbě akutních myeloidních leukémií (AML) i akutních lymfoidních leukémií (ALL) se stále hojně používají anthracyklinová antibiotika, především daunorubicin. I přes vysokou efektivitu těchto léčiv je léčba limitována kvůli kardiotoxicitě a rezistenci nádorových buněk vůči anthracyklinům. Mezi mechanismy, které se podílí na vzniku anthracyklinové rezistence patří metabolická přeměna (redukce) anthracyklinů na méně účinné sekundární alkoholy, která je katalyzovaná enzymy ze skupiny aldo-ketoreduktas (AKR) a dehydrogenas/reduktas s krátkým řetězcem (SDR). Objevení vhodných inhibitorů AKR a SDR enzymů by tak mohlo pomoci k překonání anthracyklinové rezistence i ke snížení kardiotoxicyty způsobené těmito léčivy. Cílem této diplomové práce bylo zjistit, zda kyselina all-trans-retinová, cyklofosfamid, cytarabin, kladribin a prednisolon inhibují anthracyklinreduktasy AKR1A1, AKR1B10, AKR1C3 a AKR7A2 a CBR1. Metodika diplomové práce zahrnovala in vitro inkubace...
|
|
|
Depletion of Treg cells for potentiation of cancer treatment with HPMA copolymer-bound cytostatic drug conjugates"
Dvořáková, Barbora ; Kovář, Marek (vedoucí práce) ; Reiniš, Milan (oponent)
Nádorová onemocnění představují závažný celosvětový problém, přičemž incidence jejich výskytu stále narůstá. Jelikož podávání řady běžně užívaných protinádorových terapeutik způsobuje vážné vedlejší účinky, je věnována velká pozornost tvorbě nových šetrnějších léčebných postupů. Cílem této práce bylo odstranění regulačních T (Treg) buněk z organismu aniž by došlo k ovlivnění dalších imunokompetentních buněk, které hrají významnou roli v eradikaci nádoru. Je známo, že Treg buňky tlumí protinádorové imunitní reakce a podporují růst nádoru. Jejich eliminace by tudíž v kombinaci s chemoterapií vybranými konjugáty léčiv založených na N-(2-hydroxypropyl)methakrylamidu (HPMA) mohla vést k indukci protinádorové imunitní odpovědi a rejekci nádoru. Původní snaha spočívala v odstranění Treg buněk z organismu bez použití běžně užívané depleční anti-CD25 mAb. Daná protilátka je totiž charakteristická svým dlouhým setrváváním v oběhu a schopností inhibovat aktivované efektorové buňky (CD25+ ). Pomocí IL-2/anti-IL-2 JES6.1 mAb imunokomplexů, které selektivně indukují robustní proliferaci Treg buněk, byly tyto buňky senzitizovány k fázově specifickým cytostatikům. Aplikace vybraných cytostatik dokázala snížit množství proliferujících Treg buněk pouze na hladinu srovnatelnou s bazální hladinou pozorovanou u...
|
|
|
Nanotoxikologie pokročilých materiálů =: Nanotoxicology of advanced materials /
Michálková, Hana
V současné době je v mnoha oborech využívána široká škála nanočástic, která je poměrně dobře prozkoumána. Nicméně s vývojem nových pokročilých nanomateriálů přichází nové možnosti jejich využití jak v nanomedicíně, tak v jiných oborech, a z toho také plynou rizika spojená s jejich potencionální toxicitou. Tato práce se zabývá rozsáhlým tématem cytotoxicity jak samotných nanomateriá-lů, tak jejich úpravou pro lepší navázáním cytostatik, aby mohlo dojít k zvýšení účin-nosti. Práce je převážně zaměřena na interakce nanomateriálů s buňkami, zjištění to-xicity nanomateriálů a jejich potenciální využitelnost pro nanomedicínu. Hlavním cílem této práce je vypracovat souhrnný přehled informací o nanomateriá-lech, jejich fyzikálně-chemických vlastnostech a jejich využití v nanomedicíně, nano-částice modifikovat pro zajištění cílené léčby a testovat cytotoxicitu na vybraných buněčných liniích.
|
host ::
RSS.